光学显微镜检测真菌标本制作实验方法

2016-04-18技术资料

       常用的几种真菌标本的显微镜检查方法

显微镜下的真菌

       材料的处理
       1.组织的整体检查切取小块受病组织或寄主组织薄片,用低倍显微镜观察组织表面的病菌。这样可以看见病菌自然着生的状态。若能用聚集的强光照在标本表面,可以看得更清楚。有些时候也可剥取表皮镜检。

       2.组织进明后整体检查为了观察组织内部的病菌,可以将组织透明后作整体检查。透明的方法很多,可以根据不同的材料从有关书籍上查到不同的方法来试验。这里仅举常用的水合氯醛透明法。将小块叶片在95%的酒精与等量的冰醋酸棍合液中固定24小时,然后浸在饱和的水合氯醛的水溶液中(水合氯醛5克,水2毫升),待组织透明后,取出用水洗净,经稀苯胺蓝的水溶液染色后,用甘油封盖。

       水合氯醛透明法亦可用于枯叶表面和内部越冬的病菌。方法是将枯叶在水合氯醛饱和液中浸遗过夜(到透明为止),用清水漂洗数次,然后在10%的氢氧化钾水溶液中浸数日,以漂去枯叶的揭色。

       清水漂洗数次后,移置于95%的酒精中洗两次,在无水酒精中浸三小时(酒精要更换)除去水分,用苯酚松节油混合液(熔化的结晶苯酚40毫升与60毫升松节油混合)透明,再经二甲苯洗过后,用加拿大树胶封固。不作永久封固保存的,亦可于透明后直接显微镜镜检。