相差显微镜相板的作用

 

 

   为了达到相差效应,在相差显微镜的物镜中,装有由光学玻璃制成的相板(phase plate)。在圆形相的平面上,有一圈与周围(里外)相板厚度不同的或凸凹的圆环。其结构如图1-3。相板分两部分:
(1)共轭面(conjugate area):通常为环状,是通过直射光的部分。其环是凸起的,也可能是凹陷的。
(2)补偿面(complemetary area):共轭面内外两侧部分,是通过衍射光的部分。
在相板的共轭面或补偿面上,涂有改变光波相位或吸收光线的物质。当光线通过时,使光波的相位或振幅改变,从而达到不同的目的与观察效果。利用相板把光波相位推迟,振幅改变。相板的作用,除推迟直射光和衍射光的相位之外,还有吸收光,从而使亮度改变的作用。物镜的后焦点位于透镜中间而相板位于物镜的后焦面上,所以,相板也安装在透镜中间。
  

左上:吸收直射光的明反差相板平面和剖面图; 左下:吸收直射光的喑反差相板剖面图; 右上:吸收衍射光的明反差相板平面和剖面图; 右下:吸收衍射光的暗反差相板剖面图; 黑色:吸收光线层; 浅色:推迟相位层; 白色:玻璃。
相板的种类比较多,对光的吸收率高低不同,所以产生不同的反差效果,从反差上大致可分下列两类(图1-4):

图1-4  明反差与暗反差
左:明反差,直射光(S)与衍射光(D)相位相同,两波干涉结果合成波P=S+D,振幅加大; 右:暗反差,直射光与衍射光相位相差1/2波长,两波干涉结果合成波P=S-D,振幅变小。

(1)明反差(bright contrast)或负反差(negative contrast):是指在相差显微镜的视场中,物像亮度大于背景亮度的现象。在被检物体的折射率大于媒质时,射光被相板的共轭面(因为在共轭面上涂有改变相位和吸收光线的物质)推迟1/4波长,同时吸收80%~90%,振幅变小,致使仅由直射光照射的背景变暗。通过补偿面的衍射没有变化,由于直射光推迟1/4波长,两者(直射光与衍射光)有完全相同的相位,合成波P等于直射光S与衍射光D之合,即P=S+D,故振幅加大。物像是这两种波的合成波造成,即物像等于P。所以比只有直射光照射的背景亮得多。
(2)暗反差(dark contrast)或正反差(positive contrast):是指在相差显微镜的视场中,背景亮度大于物像亮度的现象。与明反差相反,把通过补偿面(因为在相板的补偿面上涂有改变光波相位的物质)的衍射光推迟1/4波长,使衍射光与直射光的相位相差1/2波长,同时,直射光在共轭面(上涂吸光物质)被部分吸收。由于两者在像点相互干涉的结果,使合成波(P=S-D)振幅变小,被检物像的影像比背景显着变暗。
根据上述原理所制成的显微镜便是相差显微镜,聚光镜下面装有环状光阑,物镜后焦面装有相板。


 

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